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关于SARS

1.初步的临床描述:

(1)潜伏期:2-7天。患者通常有高于 38 度的发热,并会伴有寒颤,或者其他如:头痛,倦怠和肌痛。典型的病例通常不会有皮疹,神经系统症状和肠胃系统的症状。少数比例报道有腹泻。

(2)下呼吸道期:3-7天以后,病程进入此期。干咳无痰,呼吸困难,甚至低氧血症(呼吸困难,紫绀,缺氧早期心动过速,血压升高,严重时出现心动过缓,血压下降,甚至休克),患者通常都需要气管插管或者呼吸机维持。

(3)血象:绝对白细胞计数减少,血小板减少。病程早期有肌酸磷酸激酶水平升高,肝转氨酶水平升高。

(4)治疗:目前没有特效治疗方法。

(5)预防:

  • 勤洗手

  • 保持环境卫生和空气流通

  • 避免到人群聚集或空气不流通的地方

  • 避免不必要的探病

  • 均衡饮食

  • 适量的休息和运动,增强抵抗力

SARS病毒为正链的单链RNA病毒,复制不经过DNA中间体,使用标准密码子。

2、对SARS病毒的研究结果总结:

  • SARS病人的呼吸道切片和细胞培养物的电子显微镜照片显示,冠状颗粒;

  • SARS病毒可以和I群冠状病毒的多克隆抗体发生反应;

  • 这是一种新型的冠状病毒,与冠状病毒属中其他已知的成员不同;

  • 病毒引起VERO和FRhk-4细胞病变效应,病毒复制被SARS康复人的血清所抑制;

  • 可以利用感染的细胞点和康复病人的血清进行免疫荧光检测法(Immunofluorescence assays,IFA )检测培养细胞中细胞感染有病毒,都表现出很高水平的特异性反应。 反应从负到正,或者是在非直接的荧光反应中有诊断意义的升高。

  • 美国、加拿大和香港的研究表明,非SARS病人的血清不能和新冠状病毒发生反应;

  • 冠状病毒的通用引物发现SARS病人的切片和细胞培养物中发现新型冠状病毒;

  • 传染性肠胃炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)、鼠肝炎病毒(Murine Hepatitis Virus ,MHV)、猫传染性腹膜炎病毒(Feline Infectious Peritonitis virus,FIPV)、229E人冠状病毒的超抗血清可以抑制培养的病毒生长;

  • 几个实验室对病毒的部分测序表明,新病毒和冠状病毒属相关,但不同于同属的其他3个群;

  • 动物接种试验正在进行。

3、检测SARS病毒的方法:

现有诊断手段有3种,样品处理须在3级生物安全的条件下进行,病毒培养和动物试验需要在3+级的条件下进行:

  • 1.抗体检测:ELISA(IGM/IGA)方法可以可靠地检出出现临床症状20天后SARS病人血清中的病毒抗体。某些病人在14-21天时,已经可以检测到抗体。免疫荧光法检测可以检测出病毒感染VERO细胞10天后产生的 M免疫球蛋白;

  • 2.分子检测方法:已经发展了7对引物(见附录二)使用于检测过程中,检测中的阳性对照RNA可以从Bernhard-Nocht Institute in Hamburg, Germany免费获得。检测样品包括血液、粪便、呼吸道分泌物。PCR结果可以辅助临床诊断评价,但是不能肯定或排除疾病的可能;

  • 3.细胞培养方法:利用VERO细胞来检测SARS病人的呼吸道分泌物和血液样品,阳性结果表示SARS病人感染了冠状病毒,阴性结果不表明病人不是SARS。

4、基因组测序及分析:

    目前美国(CDC,USA)和加拿大(BCCA Genome Sciences Centre, British Columbia Centre for Disease Control and National Microbiology Laboratory Canada)的实验室完成SARS病毒的基因组测序。比较二者已经公开的病毒全基因组序列,发现有很小的差异。美国Urbani株长度为29,727 nt,其5ˊ端多出一段TTATTAGGTTTTTAC(15nt);加拿大病毒株长度为29,736nt,其3ˊ端多出24个A。相对于Urbani株,加拿大病毒株其他位置的差别依次为:

7919(T→C),16622(T→G),19064(G→A),19183(C→T),20596(A→G),20910(G→T),23220(T→G),24872(C→T),26857(C→T)。

    除了这些差别,SARS病毒基因组与其他冠状病毒的结构相似。初步的基因组注释在NCBI完成,预测得到的主要蛋白质有RNA聚合酶蛋白(聚合酶1a, 1b),S蛋白(spike protein),E蛋白(small membrane protein),N蛋白(nucleocapsid protein)等。使用Clustalx 1.82,用 neighbor-joining tree方法构建的冠状病毒的进化关系树如下:

M蛋白:

  N蛋白:

S蛋白:

    可以看出,SARS病毒明显不同于同其他三个冠状病毒群,可能归属于新的冠状病毒群。和其他人类及动物冠状病毒相比,核酸序列相似性分数是0.56-0.63,氨基酸序列的相似性分数是0.57-0.74。

    在NCBI,SARS病毒为查询序列对nr库按默认条件进行blastx搜索, 发现下列几种病毒和SARS病毒的序列相似性较高:

  • NC_002645,human coronavirus 229E,27,317bp,AF304460

  • NC_001846,Murine hepatitis virus,31,357bp

  • NC_001451,Avian infectious bronchitis virus,27,608bp

  • NC_003045,Bovine coronavirus,31,028bp

  • NC_003436,Porcine epidemic diarrhea virus,28,033bp

  • NC_002306,Transmissible gastroenteritis virus,complete genome,28,586 bp

    总体上看,几种病毒的基因组结构非常相似。通过病毒基因组之间的比较,14k-16k的位置,对所有病毒,都是较为保守的区域。这区域编码RNA-dependent RNA polymerase,推测病毒的复制直接使用该酶。下图以人冠状病毒说明病毒的基因组结构。

5、抗原性分析:

对预测得到的基因进行抗原性分析,下表是分析结果。

ProteinID

& GI

MHC

Loc.

Len.

(aa)

Helix

Pro-Site

Desc. of

Protein

Loc.

Eva.

Loc.

Eva.

NP_828849

29836505

2

500-520

580

511-531

A

490-520

B

Putative

orf1ab

polyprotein

4

425-435

555-570

580

425-445

555-570

A

C

420-440

555-570

B

C

5

5-15

360-410*

580

5-15

380-410

A

A

­­­­­­­‑

360-395

-

B

6

80-200*

580

70-125,130-190

A!

80-200

A

7

35-150*

580

30-105,135-150

A

35--150

B

9

435-475

580

455-474

A

435-475

not

10

380-400

580

380-400

C

380-400

C

11

118-228

580

-

-

118-228

B

NP_828851

GI:29836496

21477_25244

85-125*

185-230*

1195-1220*

 

 

 

85-125

185-230

1195-1220

A-

C

A

85-125

185-230

1195-1220

A-

B

B

putative

spike

glycoprotein

NP_828852

GI:29836497

25253_26077

45-120**

 

45-120

A

45-120

not

putative uncharacterized protein

NP_828853

GI:29836498

25674_26138

45-55

80-90

 

-

75-135

-

A

 

 

not

not

putative uncharacterized protein

NP_828855

GI:29836504

26383_27048

20-150*

 

22-105

A

 

not

putative

protein

M

A:结果好;B:结果一般;C:结果差;-:无结果;not:没有预测

                                             摘自“中国生物信息网”

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上次更新时间:2008年05月03日